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發(fā)布時(shí)間:2023-02-14 13:29:21 作者:知網(wǎng)小編 來(lái)源:m.ld2008.cn
間接ELISA實(shí)驗(yàn)的缺點(diǎn)是存在交叉反應(yīng)的可能性(酶標(biāo)二抗直接與抗原結(jié)合),可能會(huì)增加背景,同時(shí)與直接ELISA相比,間接ELISA實(shí)驗(yàn)多了二抗孵育的步驟,實(shí)驗(yàn)周期延長(zhǎng)。 先將捕獲抗體固定于ELISA板孔中,然后加入樣品,接著加入檢測(cè)抗體。
競(jìng)爭(zhēng)法ELISA一般用于檢測(cè)小分子抗原。 小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個(gè)以上的位點(diǎn),無(wú)法同時(shí)與兩種抗體結(jié)合因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測(cè)定,故可以采用競(jìng)爭(zhēng)法模式。 一般常用于小分子、lgA、lgG、lgM等檢測(cè)。
但是由于直接ELISA的抗原不是特異性固定的,樣本中的靶蛋白及其他雜質(zhì)蛋白都會(huì)與ELISA板結(jié)合,實(shí)驗(yàn)背景會(huì)比較高。 而且直接ELISA每種靶蛋白都需要準(zhǔn)備能夠與其特異性結(jié)合的一抗,實(shí)驗(yàn)不太靈活。